QIAGEN Genomic-Tip 20/G (25)   
详细描述
从多种样本中纯化至多20 µg的高分子量DNA
- 可靠纯化长达150 kb的DNA
- 无需苯酚或氯仿抽提
- 方便同时处理多个样本
QIAGEN Genomic-tip是重力流阴离子交换柱,可从多种生物样本中高效纯化基因组DNA,纯化得到的DNA片段长达150 kb,平均片段长度为50 – 100 kb。
QIAGEN Genomic-tip实验流程。
先裂解样本(组织样本采用机械破碎),同时将蛋白质置于适当的裂解缓冲液中变性。然后加入QIAGEN Protease或Proteinase K,孵育一段时间后,将裂解物上样至QIAGEN Genomic-tip。DNA结合至离心柱上,其他细胞成分则可通过。通过洗涤步骤去除残留的污染物后,洗脱纯的高分子量DNA,并利用异丙醇进行沉淀。
长达150 kb的基因组DNA。
对使用QIAGEN Genomic-tips纯化获得的DNA(2 µg)进行脉冲场凝胶电泳分析。M:分子量标记。
QIAGEN Genomic-tip分离过程是非常温和的,DNA的剪切可以忽略不计。纯化得到的DNA片段可达150 kb,平均长度为50–100 kb。纯化得到的DNA不含RNA、蛋白质、代谢物等污染物,A260/A280 比值在1.7–1.9之间。
QIAGEN Genomic-tip有不同规格,可满足不同制备需求,并提供多种操作手册,包含从不同类型样本中纯化基因组DNA的实验方案。Genomic DNA Buffer Set提供适用于血液、组织、培养细胞、酵母和细菌的专用裂解液,以及其他必需的缓冲液,可单独订购。
纯化得到的DNA可用于直接细菌基因组测序。
样本来源 | 样本量 | 产量(µg) |
---|---|---|
全血(人类) | 1 ml | 15–20 |
培养细胞(HeLa) | 5 x 106 | 15–20 |
组织(肝脏) | 15 mg | 15–20 |
酵母(S. cerevisiae) | 1 ml | 18–20 |
革兰氏阴性菌(大肠杆菌) | 0.6–1.2 ml | 16–20 |
革兰氏阳性菌(B. subtilis) | 1.2–1.8 ml | 16–20 |
QIAGEN Genomic-tip利用独特的QIAGEN阴离子交换技术,从多种生物样本中纯化高分子量DNA,且无需苯酚或氯仿抽提。经优化的裂解缓冲液,适用于不同的样本类型,使得核酸酶、组蛋白、DNA结合蛋白等蛋白质以及具有传染性的病毒等迅速变性。该缓冲液提供合适的pH值和低盐环境,使DNA与QIAGEN交换柱上的树脂结合,蛋白质、碳水化合物、代谢物等细胞组分随流出液流出。用高盐洗脱液洗脱纯化的DNA。Genomic-tips利用重力流工作原理,无需专人照看。该流程最大程度上减少了手动操作时间,是同时处理多个样本的理想选择。
首先裂解样本(组织样本需要机械破碎),在相应的裂解缓冲液中蛋白质变性。然后加入QIAGEN Protease或Proteinase K,孵育一段时间后,将裂解产物上样至QIAGEN Genomic-tip。DNA结合到交换柱上,其他细胞组分随流出液流出。随后进行洗涤步骤,洗去残留的污染物。最后洗脱得到纯化的高分子量DNA,在异丙醇中沉淀。按照此流程纯化细菌DNA仅需20分钟,纯化血液和培养细胞只需30分钟,纯化组织和酵母DNA需40分钟。
QIAGEN Genomic-tip 20/G纯化得到的DNA十分适用于以下应用:
- Isolation of genomic DNA from plants and filamentous fungi using the QIAGEN® Genomic-tip - (EN)
- (EN) - QIAGEN Genomic DNA Preparation — April 2012
- Isolation of genomic DNA from flies using the QIAGEN® Genomic-tip - (EN)
- Isolation of genomic and viral DNA from lymphocytes using the QIAGEN® Genomic-tip - (EN)
- Isolation of genomic DNA from mosquitoes or other insects using the QIAGEN® Genomic-tip - (EN)
- Isolation of genomic and plasmid DNA from cell cultures using the QIAGEN® Genomic-tip - (EN)
- QIAGEN Genomic DNA Handbook - (EN)
- (EN) - QIAGEN Genomic DNA Handbook — April 2012